بررسی اثر ضد قارچی عصاره تام متانولی و فراکسیون های اتردوپترولی، کلروفرمی، اتیل استاتی،متانولی و آبی
دسته بندي :
کالاهای دیجیتال »
رشته پزشکی (آموزش_و_پژوهش)
این پایان نامه در قالب فرمت word قابل ویرایش ، آماده پرینت و ارائه به عنوان پروژه پایانی میباشد.
Otostegia persica
یکی از گیاهان تیرهLamiaceae ( نعنا) می باشد که در طب سنتی از جوشانده بخش هوایی آن برای درمان مالاریا، کاهش قند خون و کاهش فشار خون و رفع تب استفاده می گردد.
نام این گیاه در فرهنگ فارسی " گلدر" می باشد. این جنس در ایران ۳گونه گیاه علفی چند ساله دارد:
Otostegia aucheri, Otostegia michauxii, Otostegia persica که از بین این ۳ گونه، O.persicaوO.michauxiآندمیک ایران میباشند.
عمده ترین ترکیباتی که در این گیاه مورد مطالعه قرار گرفته اند ، دی ترپنوییدها بوده است. اثرات درمانی جالب توجهی از این گیاه گزارش شده است که از آنجمله میتوان به اثر آنتی اکسیدان ، اثر آنتی گلایکیشن ، کاهش قند خون ، اثر بر سندرم محرومیت از مورفین ، اثز آنتی باکتریال قابل توجه و قابلیت مهار آنزیم استیل کولین استراز اشاره کرد.
اهداف:
با توجه به اثرات فارماکولوژیک متعدد و اینکه تا کنون اثر ضد قارچ این گیاه بررسی نگردیده است، برآن شدیم تا اثر فوق را برای اولین بار بر روی عصاره تام متانولی و فراکسیونهای اتردوپترولی، کلروفرمی، اتیل استاتی،متانولی و آبی قسمت هوائی گلدار گیاه را روی9 سوش قارچی :Trichophyton verrocosum, Epidermophyton floccosum, Microsporum gypseum Aspergillus flavus, Aspergillus fumigates, Candida albicans, Trichophyton mentagropheytes, Trichophyton rubrum, Microsporum cani بررسی نمائیم.
روش های اجرا:
قسمت های هوایی گیاه Otostegia persica در تاریخ 20 خرداد1390 در نزدیکی بندر عباس جمع اوری شد. گیاه بعد از جمع آوری و شناسائی علمی ، پودر شده و عصاره تام متانولی آن به روش پرکولاسیون تهیه گردید. فراکسیونهای اتردوپترولی، کلروفرمی، اتیل استاتی،متانولی و آبی آن به ترتیب به روش پرکولاسیون از گیاه پودر شده تهیه شد. عصاره و فراکسیونهای بدست آمده تغلیظ و در نهایت خشک شده و جهت بررسی اثر ضد قارچی در ظروف تمیز، تیره و در جای خنک نگهداری شد. برای بررسی اثر عصاره و فراکسیونهای حاصل از گیاه بر روی قارچ هااز روش چاهک استفاده شده است.
به این ترتیب که در چاهکهائی به قطر نیم سانتیمتر عصاره و فراکسیونهای مورد نظر ریخته شد و پس از آن قارچها کشت داده شد. جهت انجام عصاره های بدست امده از گیاه فوق رابه روش خیساندن تهیه نموده و پس از تبخیر حلال عصارهها را با غلظتهای 200,100,50,25,12.5,6.25 mg\ml با کمک حلال آب و اتانول 96 تهیه گردید. سپس اثر ضد قارچی عصارهها به روش چاهک در محیط سابور دکستروز اگار و سابور حاوی کلرامفنیکل و سیکلوهگزامید بررسی شد. برای کنترل + از داروی ضد قارچ وبرای کنترل – از حلال استفاده شد.
بررسی روش های دیگر:
روش اختلاط:
برای انجام این روش بعداز اماده کردن محیط کشت غلظت های ml /100mg /ml, 200mg , 50mg/ml ,25mg/ml ,12.5mg/ml ,6.25mg/ml که در اب مقطر استریل حل کرده آماده کرده ودر محیط کشت گرم ریخته و هم زده ودر پلیت ها سوسپانسیون اماده از محیط کشت و عصاره را ریخته شده وگذاشته تا سرد شدو بعد از24 ساعت قارچ های مورد نظر را روی محیط کشت اماده شده کشت داده شده است.
روش سوسپانسیون قارچ و عصاره گیاه:
برای انجام این روش غلظت های ذکر شده در بالا را که در 1cc اب مقطر حل کرده ومقدار مشخصی از قارچ های مورد نظر رادر عصاره های اماده ریخته و 1 ساعت سوسپانسیون را بحال خود رها کرده وسپس این سوسپانسیون راروی محیط کشت که قبلا اماده کرده و بسته شده ریخته و 7روز بعد نتیجه بررسی شد.
نتایج:بر اساس بررسی های انجام شده در این 3 روش اثر ضد قارچی این گیاه مشاهده نشد.
گیاهان اغلب منبع منحصر به فردی براي داروهای مصرفی جامعه بشری بوده اند و این داروها با منشأ طبیعی نقش مهمی در درمان بیماری ها به عهده دارند یکی از مشکلات مهمی که بشر از ابتدای خلقت با آن دست به گریبان بوده است، بیماریهای قارچی است و با توجه به عوارض نامطلوب و ناگوار داروهای صناعی، ضرورت دستیابی به ترکیبات طبیعی جدید با فعالیت ضد قارچی بیشتر احساس می گردد.
گیاه Otostegia persica (Burm.) Boiss از خانواده نعنا بوده با توجه به اینکه تا کنون هیچ گونه مطالعه قارچ شناسی روی آن انجام نگرفته است برآن شدیم تا در مطالعه ی حاضر برای اولین بار اثر ضد قارچی گیاه را با روش های استاندارد بصورت مقدماتی مشخص کرده و اثرات ضد قارچی آن را برروی9 سوش قارچی
Microsporum gypseum, Epidermophyton foccosum, Trichophyton vorrocosum, Trichophyton mentagropheytes, Aspergillus fumigates, Aspergillus flavus, Microsporum canis, Trichophyton rubrum, Candida albicans.
بررسی نماییم.
1-2.بيان مساله
کشور ایران با دارا بودن تنوع آب و هوایی و وجود تنوع اقلیمی در اقصی نقاط کشور دارای پوشش گیاهی متنوعی است. خصوصیات بسیاری از گیاهان این پوشش گیاهی تحت مطالعه قرار گرفته و این در حالی است که بر روی بسیاری، از آنها هنوز تحقیقی صورت نگرفته و اثرات آنها مشخص نیست.
از طرف دیگر داروهای سنتزی قادر به تسکین یا درمان کلیه مشکلات نمی باشند. امروزه بسیاری از داروهای گیاهی و طبیعی در رشته های گیاهی درمانی، هومیوپاتی، رایحه ی درمانی، گل درمانی و روش های طب مکمل دیگر، در حال استفاده وسیع بوده و میلیون ها نفر در جهان از آن استفاده می کنند همچنین داروهای مصنوعی به دلیل محدود بودن ماده ی مؤثره دارای اثر اختصاصی و اکثراً یک بعدی بوده در حالی که داروهای گیاهی در بر دارنده شمار فراوانی ماده بوده که به طور چند بعدی تأثیر نموده و ضمن ایجاد اثرات مختلف و مکمل دارای آثار جانبی کمی می باشند. چرا که تعداد زیادی از مواد موجود در گیاهان، مسئول کاهش یا از بین بردن عوارض جانبی هستند.
1-در سال 2009 طی بررسی فیتوشیمیایی که بر روی بخش هوایی Otostegia persica انجام گرفت، 4 دی ترپنوئید استخراج و تعیین ساختار شدند.
2- در سال ۲۰۰۵ برای اولین باربر روی O.persica یک تحقیق فیتوشیمیایی انجام شد.۳ فلاونول کامپفرول ،morin و کورستین در این گیاه شناسایی شد. کامپفرول و کورستین آگلیکون فلاونول می باشند و بطور وسیعی در گیاهان پراکنده اند.(3)
3- طی بررسی که در سال 2010 انجام گرفت، اثر آنتی گلایکیشن این گیاه به اثبات رسید و یک فلاونوئید به نام اوپاتورین در این رابطه استخراج و تعیین ساختار گردید(4).
4- در سال 2010 اثر ضد دیابت این گیاه در موشهای دیابتی القا شده با استرپتوزوسین به اثبات رسید (5).
5- در سال 2004 اثر قابل توجه این گیاه بر سندرم محرومیت از مورفین ثابت شد (6).
6- در سال 2006 بررسیهای انجام شده، اثر قابل توجه آنتی باکتریال رانشان دادند (7).
1-3.هدف اصلي
بررسی اثر ضد قارچی عصاره تام متانولی و فراکسیون های اتردوپترولی، کلروفرمی، اتیل
استاتی ،متانولی و آبی بخش هوائی گلدار Otostegiapersica (Burm.) Boiss